以连接后筛选为基础的定向基因重组技术

发明涉及生物技术领域一种新的基因重组技术。在传统的非定向基因重组技术基础上，定向重组载体和反向连接的定向目的基因之间形成的新的酶切位点，而正向连接的目的基因和定向重组载体之间不能形成相应的酶切位点。利用相应的限制性核酸内切酶对错误连接形成的酶切位点进行处理，使反向连接的目的基因难以进入宿主细胞或者进入细胞后难以克隆扩增，从而达到定向克隆的目的。该技术是在传统技术基础上进行的改造，具有技术简单，周期短，费用低，操作简单等优点，适合实验室表达研究和大规模的基因表达操作。