鬼臼酰肼哌啶氮氧自由基腙(GP1)抑制胃癌细胞生长及血管生成因子表达的实验研究

目的:研究稳定氮氧自由基自旋标记的鬼臼毒素衍生物-鬼臼酰肼哌啶氮氧自由基腙(GP1)在体外对胃癌细胞BGC-823、MKN-45的生长抑制作用及抗血管生成作用的机理。方法:采用CCK-8法测定GP1对胃癌细胞增殖的影响;流式细胞术检测GP1诱导胃癌细胞凋亡的作用;Transwell小室法检测GP1对胃癌细胞迁移能力的影响;RT-PCR法测定血管生成因子VEGF-A、VEGFR、Ang-1、Tie2及MMP-2和MMP-9 m RNA的表达。结果:CCK-8法结果示不同浓度的GP1对胃癌细胞增殖均有一定的抑制作用且在浓度为100μg/m L抑制作用最明显,BGC-823在24、48、72 h时的抑制率依次为31.31%、36.69%、39.23%,MKN-45在24、48、72 h时的抑制率依次为64.38%、73.16%、80.32%;流式细胞检测浓度为100μg/m L的GP1作用于胃癌细胞24、48 h均出现诱导凋亡的作用。GP1作用于BGC-823细胞24、48 h后的凋亡率分别为8.00%、16.67%,作用于MKN-45细胞24、48 h后的凋亡率分别为7.33%、27.67%;Transwell小室法检测浓度为100μg/m L的GP1作用于胃癌细胞24、48 h均抑制细胞迁移。BGC-823细胞24、48 h的抑制迁移率分别为18.85%、25.15%;MKN-45细胞24、48 h的抑制迁移率分别为17.29%,24.28%;RT-PCR测定浓度为200、100、50μg/m L的GP1作用胃癌细胞VEGF-A、VEGFR、Ang-1、Tie2、MMP-2、MMP-9 m RNA的表达均较对照组降低。结论:GP1对在体外生长的胃癌细胞有明显的抑制作用,且可能是通过诱导胃癌细胞凋亡而抑制其增殖的;GP1可能是通过抑制胃癌细胞MMP-2、MMP-9 m RNA的表达来抑制其迁移;GP1具有抑制VEGF-A、VEGFR、Ang-1、Tie2 MRNA表达的作用,推测GP1可能具有抑制胃癌血管生成的作用。