L-ficolin(P35)与HCV和HBV感染的相关性

目的探讨L-ficolin与丙型肝炎(丙肝)病毒(HCV)、乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)感染的相关性,为丙肝、乙肝的免疫治疗探索新的途径。方法采用ELISA检测103例丙肝、126例乙肝患者血清中的L-ficolin的含量,并与126例正常人血清中的L-ficolin含量进行比较。同时,用荧光染料FITC(或PE)标记L-ficolin的抗体行流式细胞术(FCM)检测丙肝、乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)和DC细胞内L-ficolin的表达。根据以上两个实验的结果将HCV的各个基因成分包括NS2、NS3、NS4a、NS4b、NS5a、NS5b、E1、E2、Core及pblue-HBV的真核表达质粒,与L-ficolin构建在p GL2载体上的启动子共转染到Hep G2细胞,48 h后收获细胞,用Luciferase荧光报告基因试剂盒检测细胞荧光,探讨是病毒的何种成分与L-ficolin表达相关。结果夹心ELISA法检测到丙肝患者血清中的L-ficolin表达水平明显高于正常人(P<0.05),而乙肝患者血清中的L-ficolin表达水平却比正常人低(P<0.05)。FCM检测丙、乙肝患者的PBMC也得到同样的结果,且进一步发现L-ficolin可能主要表达在DC细胞中。同时用HCV/HBV感染纯化的人DC细胞,可见HCV感染的DC细胞中的L-ficolin升高,而HBV感染的DC细胞中的L-ficolin降低,进一步验证上述的实验结果。用Luciferase荧光报告基因试剂盒检测共转染病毒各种基因成分与L-ficolin启动子得到的荧光值表明,HCV全基因组以及部分基因如Core、NS4a、NS4b等能使L-ficolin启动子荧光表达上升,而HBV复制子则使L-ficolin启动子荧光表达下降。免疫组化结果显示正常人肝组织表达L-ficolin蛋白,但是发生乙肝及丙肝感染癌变的组织中L-ficolin蛋白表达均下降甚至不表达。结论L-ficolin在丙肝、乙肝患者体内表达异于正常人,提示L-ficolin在对抗HCV、HBV感染有一定作用。HCV能够激活L-ficolin的启动子,而HBV可能抑制L-ficolin启动子的激活。同时肝组织是产生L-ficolin蛋白的场所,当肝组织癌变,则L-ficolin蛋白表达发生异常。提示L-ficolin蛋白与肝组织癌变相关。