摘要
目的探讨沉默钙激活氯通道(anoctamin1,ANO1)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及其分子机制.方法采用siRNA沉默ANO1在PC-3细胞的表达;采用ELISA、流式细胞仪检测细胞凋亡;采用Apo-ONEHomogeneous Caspase-3/7Assay检测Caspase活性;采用基因表达谱分析检测沉默ANO1表达后PC-3细胞内基因变化,以及Real-timePCR和Westernblot验证.将全长ANO1基因(来源于NCBI)与pIRES2-EGFP融合,构建ANO1-IRES2表达载体,获得稳定表达ANO1的RWPE-1细胞系.结果ANO1在人前列腺癌PC-3细胞中呈高表达,沉默ANO1可诱导PC-3细胞凋亡,并增加肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF-α)表达和Caspase-3/7活性.TNF-α抑制剂来那度胺(lenalidomide)20nmol·L^-1可逆转沉默ANO1诱导的细胞凋亡.同时,ANO1在人正常前列腺细胞RWPE-1中呈低表达,过表达ANO1可降低RWPE-1细胞凋亡,同时降低TNF-α表达和Caspase-3/7活性.总之,ANO1表达与TNF-α呈负相关.结论沉默ANO1表达可诱导PC-3细胞凋亡,其机制可能与激活TNF-α介导的信号转导通路相关.
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第B11期9-9,共1页
Chinese Pharmacological Bulletin
基金
北大医学部方正创新药物研究基金资助项目