人IL-18 cDNA的RT-PCR扩增及其重组质粒的构建

为构建人白细胞介素18(IL-18)的重组质粒,用 RT-PCR 技术从健康人外周血单核细胞中扩增出编码人 IL-18的 cDNA,并将此基因定向克隆人表达载体 pBV220中,通过对转化子的筛选得到带有 IL-18插入片段的阳性克隆。经酶切分析及核苷酸测序表明,克隆到的基因与文献报道完全一致。表达的重组 IL-18占菌体总蛋白质的20%。表达的蛋白分子量约为18.3kD。表达产物主要以包涵体的形式存在。