能量代谢异常与慢性粒细胞白血病伊马替尼耐药的关系

目的探讨慢性粒细胞性白血病(CML)细胞糖酵解相关分子表达与伊马替尼(IM)耐药的关系。方法以K562和K562-R细胞为研究对象,观察耐药与敏感CML细胞间糖酵解活性、相关基因(HIF-1α、GLUT1和HK-Ⅱ)和ATP合成酶(ATP5b)表达差异,葡萄糖消耗实验检测细胞糖酵解活性,q PCR和Western blot分别检测糖酵解相关基因mRNA和ATP5b的表达;并对两细胞株分别予以IM、2-脱氧葡萄糖(2-DG)、3溴丙酮酸(3Br PA)、2-DG+IM和3Br PA+IM处理,通过MTT和流式细胞术检测处理前后的细胞活性和凋亡情况。结果耐药细胞株K562-R的糖酵解活性及HIF-1α、GLUT1和HK-ⅡmRNA表达明显高于IM敏感细胞K562(P<0.05,P<0.01),而ATP5b蛋白表达明显低于K562细胞(P<0.001)。经过3 d培养,IM、2-DG、3Br PA、2-DG+IM和3Br PA+IM处理的K562细胞增殖活性小于未处理者(P<0.05,P<0.01)。2-DG或3Br PA联合IM均不具有协同杀伤作用。而K562-R细胞中,IM、2-DG、3Br PA、2-DG+IM和3Br PA+IM处理的细胞增殖活性小于未处理者。2-DG或3Br PA联合IM均具有协同杀伤作用。而各项处理对K562和K562-R细胞凋亡无明显影响(P>0.05)。结论 IM耐药性与CML细胞的糖酵解活性升高、线粒体功能降低有关,抑制糖酵解可调节K562-R细胞对IM的药敏性。