重型再生障碍性贫血患者混合血清对转染Jak2v617f小鼠32D细胞的影响

目的观察小鼠32D细胞转染Jak2v617f后,重型再生障碍性贫血(SAA)患者混合血清对其增殖、凋亡能力及细胞周期的影响。方法实验分4组:32D组及32D+SAA组,即未感染病毒的32D细胞分别与正常混合血清或SAA患者混合血清培养;32D+Jak2v617f组及32D+Jak2v617f+SAA组,即感染上Jak2v617f慢病毒的32D细胞分别与正常混合血清或SAA患者混合血清培养。用MTS法检测4组细胞的增殖能力;利用流式细胞仪检测细胞凋亡能力及细胞周期的变化。结果与32D组比较,32D+Jak2v617f组48、72 h时细胞增殖能力增强(P<0.01);32D+SAA组48、72 h时细胞增殖受到抑制(P<0.05,P<0.01),而32D+Jak2v617f+SAA组细胞增殖也受抑制并恢复至32D组水平(P>0.05)。流式细胞仪检测发现32D+SAA组晚期凋亡细胞增多;相反地,32D+Jak2v617f组早、晚期凋亡细胞均减少;32D+Jak2v617f+SAA组早、晚期凋亡细胞也减少,但减少程度不如32D+Jak2v617f组。32D+SAA组以G_1期细胞比例最高,为73.55%,S期为20.72%;32D+Jak2v617f组则相反,G_1期细胞比例最少,为40.04%,S期细胞比例则最高,为53.83%;32D+Jak2v617f+SAA组则与32D组相仿。结论Jak2v617f基因可能通过减少细胞凋亡、增强DNA复制的S期而提高细胞的增殖能力;SAA患者混合血清则与之相反,并可能遏制Jak2v617f基因的这种增殖趋势。