金钱白花蛇与三种常见混伪品多重PCR鉴别方法

目的建立一种快速、高效的鉴别金钱白花蛇(银环蛇)与三种常见混伪品的多重PCR方法。方法采用动物DNA提取试剂盒提取金钱白花蛇、赤链蛇、赤链华游蛇与金环蛇DNA;根据各样品COI(动物线粒体细胞色素b基因)序列设计4对不同长度的特异性引物,建立并优化多重PCR反应体系,通过电泳检测扩增产物分子量差异实现4种蛇类的快速鉴别。结果针对金钱白花蛇、赤链蛇、赤链华游蛇与金环蛇所设计的4对引物分别扩增出136、195、244和315bp的目的条带;每对引物特异性扩增,灵敏度为皮克级。结论首次建立了金钱白花蛇与常见三种相似混伪品的多重PCR方法。此方法特异性高,为多重PCR技术体系在中药材金钱白花蛇的快速检测提供参考。