体外分离培养人源性脂肪间充质干细胞及其鉴定

目的体外分离培养人皮下脂肪来源的细胞群,依据ISCT公布的国际标准规定通过形态观察、免疫表型检测及多种分化潜能的鉴定证实体外获得的细胞群为脂肪来源的间充质干细胞。方法采用0.1%胶原酶I及0.25%胰酶双消化法进行细胞的体外分离,LG-DMEM培养基加入体积分数为10%胎牛血清,于37℃、5%CO2的饱和湿度条件下培养,待细胞生长至70%～80%融合时消化传代扩增。通过倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞免疫表型表达;取第3代细胞,于基础培养基中分别加入成骨(10%胎牛血清、0.1mmol/L地塞米松、50mg/L抗坏血酸、10mmol/Lβ-磷酸甘油)