离子交换层析分离纯化人α1-抗胰蛋白酶

目的建立一种新的用离子交换层析从Cohn组分IV沉淀中分离纯化α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)制剂的工艺。方法以Cohn组分Ⅳ为原料,用12倍体积20mmol/L Tris-HCl缓冲液溶解后,加入2.5%气相二氧化硅搅拌吸附脂蛋白等杂质。抽提液经离心收集上清,再用0.45μm滤膜过滤。将滤液上样于CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析柱,收集未吸附的流穿蛋白液。再将收集的流穿液上样于Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱,上样及平衡液清洗后,用含60mmol NaCl的缓冲液洗涤杂蛋白,再用含100mmol/L NaCl的缓冲液洗脱,收集洗脱液。