鼻咽癌细胞来源外泌体的提取和鉴定

目的从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1中分离外泌体，并对CNE-2所得外泌体进行鉴定。方法使用ExoQuick—TC（SBI）试剂盒法从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1培养上清液分离出外泌体，使用透射电镜观察其形态特征，BCA法进行蛋白定量，Westernblot进行外泌体特异性抗原分子CD63及筏蛋白-1鉴定。结果3种鼻咽癌细胞系培养上清液中均分离出大量泡状物，透射电镜下观察呈圆形的囊泡，直径为40～130nm，具有完整胞膜。且CNE-2来源的此种泡状物表达外泌体特异性膜筏蛋白-l、CD63。10mL对数生长期CNE-2培养上清液得到487μg／mL（以蛋白计）的外泌体200μL。结论本实验室保存的3种鼻咽癌细胞系很可能均能产生外泌体，ExoQtfick—TC（SBI）法能够简便快速地从鼻咽癌细胞系中提取到外泌体，不需要超速离心，为鼻咽癌的防治研究提供了新的研究方法和靶点。