甘露糖结合凝集素对妊娠期糖尿病孕妇外周血单个核细胞炎症因子的调节作用

目的探讨甘露糖结合凝集素（mannose—binding lectin，MBL）在妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）炎症损伤中的作用。方法2014年9月14日至2015年1月10日，在安徽医科大学第一附属医院产前保健、且无GDM高危因素的孕妇中，随机选取GDM孕妇50例，对照组为同期口服葡萄糖耐量正常的孕妇37例。检测GDM组与对照组血浆脂多糖、MBL以及炎症因子[白细胞介素（interleukin，IL）-1、IL-10、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α]水平。抽取孕妇空腹外周静脉血，分离单个核细胞，进行细胞培养，GDM组采用1μg／ml脂多糖和重组MBL处理，分为6个亚组：A组（未处理），B组（仅脂多糖处理），C、D、E和F组采用脂多糖及浓度分别为0．1、0．5、1．0和2．0μg／ml的重组MBL处理，检测各亚组炎症因子（IL-1、IL-10、TNF-α）水平，以及Toll样受体（Toll—likereceptor，TLR）4和核转录因子（nuclear—factor，NF）-κB蛋白表达。统计学分析采用独立样本t检验、方差分析、LSD法、Pearson相关分析。结果GDM组血浆脂多糖水平高于对照组[（0．92±0．41）与（0．57±0．22）EU／ml，t=3．21]，MBL水平低于对照组[（254．4±123．4）与（424．8±150．4）μg／ml，t=-1．96]，IL-1和TNF-α水平均高于对照组[分别为（14．5±2．1）与（10．5±4．0）pg／ml，（5．72±0．99）与（2．79±0．87）pg／ml，t值分别为-3．46和3．771，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。GDM组中，炎症因子水平与脂多糖水平呈正相关，与MBL水平呈负相关（P值〈0．05）；脂多糖与MBL水平呈负相关（r=-0．51，P〈0．05）。细胞培养结果显示，GDM组外周血单个核细胞TLR4和NF—κB蛋白表达水平均高于对照组（分别为1．85±0．41与1．27±0．72，1．20±0．62与0．84±0．31，t值分别为-13．57和-7．19，P值均〈0．05）。采用脂多糖及不同浓度的重组MBL干预后，与B组IL-1、IL-10、TNF-α水平及TLR4、NF—κB蛋白表达量[分别为（15．44±2．29）、（4．77±1．84）、（5．83±1．08）pg／ml及2．01±0．15、1．47±0．04]比较，随着重组MBL浓度增加，D组[分别为（13．37±1．34）、（3．13±1．71）、（4．23±1．71）pg／ml及1．58±0．69、1．20±0．161、E组[分别为（12．18±1．38）、（2．72±0．69）、（3．15±0．78）pg／ml及0．85±0．02、0．89±0．021、F组[分别为（10．59±1．20）、（2．03±0．92）、（2．71±0．96）pg／ml及0．56±0．44、0．61±0．21]逐渐降低，差异均有统计学意义（LSD检验，P值均〈0．05）。结论GDM孕妇血浆中MBL水平降低，可能导致对TLR4／NF—κB通路的抑制作用减弱，从而形成慢性持续性炎症损伤，参与GDM发病。