Na^+/Ca^(2+)交换调节的La^(3+)跨淋巴细胞膜的定量研究

利用荧光浓度指示剂fura-2研究了La^(3+)能否利用Na^+/Ca^(2+)交换系统进入人外周血淋巴细胞以及La^(3+)对Na+/Ca^(2+)交换的影响.并首次用此方法研究了La^(3+)能否在细胞器（主要为内质网和线粒体）中蓄积.实验结果表明,用乌本苷预处理细胞并在无Na^+介质中测试,可明显观察到La^(3+)跨膜进入淋巴细胞,而且胞内La^(3+)的浓度与胞外的La^(3+)浓度成正比.但当胞外La^(3+)浓度大于0.4mmol/L时,不再观察到340/380nm荧光比值的变化,此时细胞内La^(3+)浓度约为15×10^(-12)mol/L.当La^(3+)浓度较大时（0.1mmol/L）抑制Na^+/Ca^(2+)交换操纵的Ca^(2+)的进入,而较低浓度（0.01mmol/L）时却刺激Ca^(2+)进入.另外从实验结果可推测La^(3+)可以被依赖ATP的质膜钙泵泵出胞外.胞内钙库用离子霉素耗竭后,La^(3+)内流过程中再次加入离子霉素后,可明显观察到340/380nm荧光比值增大,说明La^(3+)在细胞器中有一定程度的蓄积.在模拟胞内离子组分的缓冲液中（pH=7.05）,fura-2对La^(3+)的检测限为10^(-12)mol/L,对Ca^(2+)的检测限为10^(-8)mol/L,并测得fura-2-La^(3+)的络合比为1:1,表观离解常数为1.7×10^(-12)mol/L.