miR-21对氧化应激诱导的心肌细胞损伤的影响

目的探讨miR-21对过氧化氢(H_2O_2)诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响。方法体外培养H9c2心肌细胞,实验分为4组,空白对照组、阴性对照组(miR-21mimics NC)、H_2O_2组、H_2O_2+miR-21mimics组;采用MTT法及AnnexinV-PI流式双染法检测各组细胞活力和凋亡情况;DCFH-DA探针负载方法检测各组细胞内活性氧(ROS)水平;分光光度法检测各组丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测程序性细胞死亡因子4(PDCD4)、Bax、Bcl-2及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因蛋白(PTEN)/蛋白激酶(AKT)信号通路激活情况。结果与空白对照组及阴性对照组比较,H_2O_2组中细胞活力下降(P<0.01),ROS荧光强度及MDA水平增加(P<0.01),SOD水平下降(P<0.01),细胞凋亡率上升(P<0.01),Bcl-2表达及AKT磷酸水平下调(P<0.01),Bax、PDCD4及PTEN表达上调(P<0.01)。与H_2O_2组比较,H_2O_2+miR-21mimics组中细胞活力提高(P<0.01),ROS荧光强度及MDA水平降低(P<0.01),SOD水平提高(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),Bcl-2表达及AKT磷酸水平上调(P<0.01),Bax、PDCD4及PTEN表达下调(P<0.01)。结论 miR-21过表达能显著抑制H9c2心肌细胞氧化应激损伤,与清除细胞内氧化应激产物及抵抗细胞凋亡有关,可能是通过PTEN/AKT信号通路实现的。