转染Elf5基因的人卵巢癌干细胞增殖、侵袭能力及凋亡变化

目的观察转染Elf5基因的人卵巢癌干细胞增殖、侵袭能力及凋亡变化。方法将目的基因Elf5+EGFP克隆到载体pc DNA3.1中,构建重组质粒pc DNA3.1-Elf5+EGFP,转入感受态细胞,挑选阳性克隆菌落,大量抽提质粒。培养人卵巢癌干细胞并分为重组质粒组、空质粒组、空白对照组。重组质粒组转染pc DNA3.1-Elf5+EGFP真核表达载体,空质粒组转染pc DNA3.1-EGFP空载质粒,空白对照组不进行转染。采用Western blotting法检测Elf5蛋白。分别于转染后1、2、3、4、5、6 d采用MTT法检测细胞增殖能力;转染24 h后采用侵袭小室检测细胞侵袭能力并计算穿膜细胞数;转染24 h后流式细胞术检测不同周期细胞及凋亡细胞。结果成功构建了pc DNA3.1-Elf5+EGFP真核细胞表达载体,重组质粒组细胞中Elf5蛋白稳定表达。转染后1、2、3、4、5、6 d重组质粒组细胞增殖能力低于空白对照组和空质粒组(P均<0.05)。重组质粒组穿膜细胞数少于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组G_0/G_1期细胞百分比高于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组细胞凋亡率高于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。结论转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、侵袭能力受到抑制,细胞凋亡增多。