土壤微生物结构的T-RFLP及其法医学应用分析

目的用末端标记限制性片段长度多态性方法(T-RFLP),观察不同地域土壤微生物构成的多态性,为法医学土壤成分分析和地域鉴别提供适当的分析方法。方法采集吉林省和重庆市两地的土壤样本,用Power Soil试剂盒提取土壤细菌DNA,PCR扩增16S rRNA基因的多态性区域,引物的5'端采用FAM标记。扩增产物分别用MspⅠ、RsaⅠ内切酶消化后,用3130遗传分析仪进行电泳分离。采用主成分分析(PCA)法和主效可加护作用可乘模型(AMMI)进行统计分析。结果采用MspⅠ酶切后,T-RFLP法可以明确分离重庆和吉林两地的土壤样本。RsaⅠ酶切后分离效果稍差。结论 T-RFLP法可以区分来自重庆、吉林两地域的土壤样本,为法医学土壤多样性分析提供了一种可靠的分析方法。