遗传性凝血因子XLL缺陷症的分子生物学分析

目的运用分子生物学分析方法研究遗传性凝血因子 XLL 缺陷症.方法构建 1例正常人的凝血因子 XLL 野生型pIRES2-EGFP/F Ⅻ表达质粒,以及1例遗传性凝血因子XLL缺陷症患者的野生型pIRES2-EGFP/FⅫ表达质粒,并运用定点突变法构建突变型Ⅻ表达质粒,以Polyfect转染试剂介导瞬时转染293T细胞,分别测定细胞裂解液及培养上清液中Ⅻ∶Ag,测定上清液中Ⅻ∶C.结果遗传性凝血因子XLL缺陷症患者的Ⅻ中,C 为4.68%,Ag 仅为4.6%;F12基因中13、14号外显子分别发现了（G8489A、Glu502Lys）和 （C8833A、Tyr586Stop）2种复合杂合突变,与正常人比较有明显差异（p 〈0.05）.遗传性Ⅻ缺陷症患者的凝血酶生成潜力与正常人比较无明显差异（p 〉0.05）.结论分子生物学研究证实,由于遗传性Ⅻ缺陷症患者突变蛋白E502K合成与分泌障碍,形成F12基因（Glu502Lys;Tyr586Stop）双杂合突变,导致Ⅻ明显降低,也是引发患者患上遗传性Ⅻ缺陷症的原因.