摘要
目的通过体外实验探讨ITGB5在调控HCC细胞侵袭力中的作用及其相关机制。方法收集35例HCC患者的癌与癌旁组织,采用PCR技术检测ITGB5的表达量,比较ITGB5在肿瘤组织和正常组织的表达差异。使用脂质体转染技术将小干扰RNA转入Huh7与Hep3B两种HCC细胞系细胞,通过CCK8以及Transwell实验观察ITGB5敲除对HCC细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。使用PCR、Western Blot方法对侵袭相关分子以及上皮-间质转化(EMT)相关标志物进行表达量的检测,并且对调控EMT的关键转录因子进行筛选,寻找受ITGB5调控的关键转录因子。结果肿瘤组织的ITGB5表达量显著高于正常组织(<0.05)。ITGB5敲除之后,在全部两个细胞系中都观察到24 h之后细胞的增殖速度显著下降(均<0.05);肿瘤细胞的迁移与侵袭能力在ITGB5敲除后明显下降(<0.05);ITGB5敲除后,肿瘤细胞表现出更加显著的上皮样分子表型E-Cad,CLDN蛋白表达量显著升高;VIM,N-Cad,FN蛋白表达量显著下降(<0.05);转录因子Twist蛋白的表达量在ITGB5敲除后发生显著下调(<0.05)。结论 ITGB5敲除可以明显抑制HCC细胞的增殖与侵袭能力,其可能机制与其对Twist蛋白的调控有关,更加系统、深入地研究对于HCC的治疗具有深远意义。
出处
《现代实用医学》
2017年第1期26-29,共4页
Modern Practical Medicine