山奈酚和芒柄花黄素对缺氧/复氧条件下H9C2心肌细胞活性氧水平的影响

目的:分析中药单体山奈酚和芒柄花素对缺氧复氧诱导的H9C2心肌细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法:采用缺氧复氧的造模方法对H9C2心肌细胞进行造模,选用夹竹桃作为阳性药组,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验阐明含药培养基对实验体系的影响,并初步确定中药单体的给药浓度;通过倒置荧光显微镜观察经乙酰乙酸双氯荧光素(DCFH-DA)染色的H9C2心肌细胞的荧光强弱,即细胞内活性氧的变化;通过流式细胞仪进一步测定细胞内活性氧的定量变化。结果:通过MTT实验确定各组给药浓度为10-6mol/L,用DCFH-DA法染色后经倒置荧光显微镜观察各组细胞内绿色荧光有显著变化,即正常组镜下观察细胞内的荧光很暗,模型组细胞内的绿色荧光很强,发光细胞数量也相对很多,给药组细胞内绿色荧光介于两组之间,与阳性药组相似;流式细胞仪测定结果显示除山奈酚组外,各给药组与模型组相比都有统计学差异,其中以芒柄花素组、混合组、夹竹桃组最为显著。结论:山奈酚和芒柄花素对心肌细胞有一定的保护作用,能够改善细胞贴壁的状态,增加细胞存活率,降低心肌细胞内ROS水平。