重组分子靶向R9-GRIM-19融合蛋白治疗肝癌的疗效与机制

目的探讨多聚精氨酸蛋白转导域R9作为维甲酸/干扰素联合应用诱导细胞死亡相关基因(GRIM)-19载体表达R9-GRIM-19融合蛋白对肝癌的治疗作用。方法应用PCR法扩增R9-GRIM-19序列,与载体p ET32 a(+)连接,在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)上表达并经Ni2+-NTA纯化,在体外及体内检测R9-GRIM-19融合蛋白抑制肝癌生长的能力。结果 p ET32a-R9-GRIM-19重组质粒在大肠杆菌BL21菌株内实现了高效表达;R9-GRIM-19融合蛋白能够进入肝癌HepG2细胞内,并能抑制Hep G2细胞的增殖;体内抑瘤实验表明R9-GRIM-19对肝癌Hep G2小鼠移植瘤具有明显的抑制作用。结论成功地在大肠杆菌中表达了R9-GRIM-19融合蛋白,纯化的融合蛋白具有抑制肝癌生长的能力。