羊伪狂犬病毒的分离鉴定

山东省某羊场猪羊混养,羊发生了一种以口吐白沫、有神经症状、腿部部分掉毛为特征的疾病,死亡率高达100%。为确定病原,对病死羊进行病原分离、PCR检测、直接免疫荧光鉴定,确诊病原为伪狂犬病毒(PRV)。通过测序发现,分离毒株的g E基因与NCBI上公布的已知PRV基因组核苷酸序列同源性在97%~99%之间,说明分离株为伪狂犬强毒。该病毒通过BHK细胞系传代至第7代时出现了明显的细胞病变,按照Reed-Muench法计算病毒半数组织细胞感染量(TCID50)为1×107.5/m L。用分离株毒液注射体重20 kg健康绵羊2只,4 d后羊只出现伪狂犬病(PR)的典型症状。根据临床症状及PCR诊断结果,通过采取淘汰场内猪群并对猪舍加强消毒、病羊注射伪狂犬血清、假定健康羊群投喂抗病毒中药七清败毒颗粒等综合防控措施,羊场疫情得到了有效控制。