Tim-3通过胆固醇酯水解酶影响巨噬细胞泡沫化过程的机制

目的观察Tim-3是否通过调节巨噬细胞内胆固醇脂水解酶(CEH)的表达干扰泡沫化细胞的形成,进而影响动脉粥样硬化的发生发展。方法 Western印迹检测CEH蛋白的表达;液体闪烁计数测定THP-1巨噬细胞内胆固醇流出情况;HPLC检测胞内脂质含量;油红O染色显示胞内脂滴情况;ELISA检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、MIF、白细胞介素(IL)-10的分泌情况。结果 Ad-Tim-3组细胞中CEH的表达被明显抑制,胞内胆固醇流出减少,胞内总胆固醇(TC)、胆固醇酯(CE)及游离胆固醇(FC)的含量明显增加,TNF-α和MIF分泌增多,IL-10的分泌减少;Ad-CEH组和Ad-Tim-3+Ad-CEH组细胞中CEH的表达水平被明显增强,胞内胆固醇流出增加,胞内TC、CE及FC的含量明显减少,TNF-α和MIF分泌减少,IL-10分泌增多。结论 Tim-3可以通过增强巨噬细胞内CEH的活性抑制巨噬细胞向泡沫细胞的转化。