转SNanog-GFP绵羊成纤维细胞系的筛选

为了获得绵羊Nanog-GFP转基因细胞系,试验在已获得绵羊Nanog启动子带动GFP真核表达载体SNanog-p Ac GFP1-N1基础上,采用脂质体转染法将该载体导入绵羊的胚胎成纤维细胞中,在适当浓度的G418中筛选出转基因阳性细胞,观察其细胞形态以及生长曲线,通过PCR检测目的基因是否插入其基因组。结果表明:复苏前后的转基因阳性细胞的细胞形态呈成纤维细胞的长梭形,贴壁状态良好,其生长曲线为典型的S型,且PCR检测呈阳性。