摘要
目的:分析STMN2的表达对颗粒细胞Ras-MAPK信号通路的影响。方法:对雌性海兰褐壳蛋鸡颗粒细胞进行原代培养,使用腺病毒载体将STMN2过表达载体、STMN2-RNAi载体及空载体转染至颗粒细胞中,并设定对照组,提取转染后颗粒细胞的总RNA及总蛋白,采用实时荧光定量PCR及Western blot分别检测Ras-MAPK信号通路关键因子erk1、erk2、ras、elk-1、p-erk1、p-erk2的mRNA表达水平及蛋白表达水平。结果:与空载体组和对照组相比,STMN2过表达组中erk1、erk2和ras mRNA表达水平均极显著增加(p<0.01),elk-1 mRNA表达水平差异显著(p<0.05)。STMN2低表达组中erk1、elk-1 mRNA表达水平低于对照组和空载体组,且差异极显著(p<0.01),ras和erk2 mRNA表达水平差异显著(p<0.05),过表达组中,erk1、erk2、p-erk1、p-erk2和ras蛋白表达水平显著高于对照组和空载体组,且差异极显著(P<0.01),elk-1蛋白表达水平差异不显著。STMN2低表达组中erk1、erk2、p-erk1、p-erk2,elk-1、ras蛋白表达低于对照组和空载体组,且差异显著(p<0.05)。结论STMN2具有促进Ras-MAPK信号途径中各关键因子表达的作用,进一步促进卵泡颗粒细胞增殖。
