WRKY同源基因的分离与表达分析

Isolation and Expression of WRKY Homologous Genes from Prunus salicina var. cordata

以(Prunus salicina Lindli.var cordataJ.Y.Zhang et al.)为试验材料,采用稀释池PCR法,筛选叶片全长均一化cDNA文库,获得了WRKY同源基因的12个全长cDNA分别命名为PsWRKY7、PsWRKY14、PsWRKY20、PsWRKY21、PsWRKY22、PsWRKY29、PsWRKY31、PsWRKY32、PsWRKY33、PsWRKY40、PsWRKY46和PsWRKY75,长度分别为1 517、1 798、2 098、1 177、1 242、1 396、2 135、1 760、2 113、1 047、1 258和700bp,ORF长度分别为1 095、1 572、1 764、1 068、1 071、1 002、1 944、1 602、1 770、963、1 077和672bp,分别编码364、523、587、355、357、333、647、533、589、320、358、223个氨基酸。荧光定量结果显示,12个WRKY同源基因在1.0mmol/L水杨酸处理后,所获得的PsWRKY表达量均显著上调,表明WRKY基因可能是水杨酸诱导防御反应的重要调控因子。

In this study,Prunus salicina Lindli.var.cordataJ.Y.Zhang et al was chosen as experiment material,the dilution pool PCR method was used to screen a normalized full-length cDNA library of P.salicinavar.cordataleaves and to obtain 12 the full-length cDNA of WRKYhomologous genes,which are named PsWRKY7,PsWRKY14,PsWRKY20,PsWRKY21,PsWRKY22,PsWRKY29,PsWRKY31,PsWRKY32,PsWRKY33,PsWRKY40,PsWRKY46 and PsWRKY75,respectively.Their length are1 517,1 798,2 098,1 177,1 242,1 396,2 135,1 760,2 113,1 047,1 258 and 700bp,respectively.Their ORF lengths are respective 11 095,1 572,1 764,1 068,1 071,1 002,1 944,1 602,1 770,963,1 077 and 672bp.They are encoded as 364,523,587,355,357,333,647,533,589,320,358 and 223amino acids,respectively.The results of Real Time PCR showed that PsWRKYexpression levels increased significantly after spraying with 1.0mmol/L salicylic acid.This result indicated that PsWRKY might be important regulatory factor for inducing plant defense response by salicylic acid.