沉默细胞周期检测点激酶l基因对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨沉默细胞周期检测点激酶l(Chk1)基因对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响。方法培养人膀胱癌T24细胞,根据转染物的不同,将细胞分为siRNA-Chk1组、siRNA-对照序列组和空白对照组,利用实时荧光定量PCR检测各组细胞中Chk1基因表达,MTT法检测各组细胞增殖能力,利用流式细胞术检测各组细胞凋亡,利用流式细胞术检测各组细胞周期,利用Western blot法检测各组细胞中Chk1、Cdc25C和Cyclin B1蛋白表达。结果与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞中Chk1 mRNA相对表达量降低(F=43.813,P=0.000);与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞24h、48h、72h和96h时吸光度A值均降低(P<0.05);与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞凋亡率显著增加(F=90.736,P=0.000);流式细胞术检测结果显示,siRNA-Chk1组G0/G1期和S期高于siRNA-对照序列组和空白对照组,而G2/M期低于siRNA-对照序列组和空白对照组(P<0.05);与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞中Chk1、Cdc25C和Cyclin B1蛋白相对表达量均降低(P<0.05)。结论特异性沉默Chk1基因可抑制人膀胱癌T24细胞增殖,加速细胞凋亡,其机制可能与抑制Chk1/Cdc25C/CyclinB1通路而减少细胞G2/M期阻滞有关。