异泽兰黄素抑制瘢痕组织成纤维细胞增殖的机制

目的探讨异泽兰黄素对瘢痕组织成纤维细胞增殖的影响及机制。方法应用MTT法检测异泽兰黄素对瘢痕组织成纤维细胞活力的影响,流式细胞仪检测异泽兰黄素对瘢痕组织成纤维细胞中活性氧(ROS)的生成及细胞凋亡的影响,Western印迹法检测异泽兰黄素对细胞内JNK和Bcl2磷酸化的影响。结果 2.5、5.0、10.0、20.0、40.0μg/ml异泽兰黄素作用细胞24 h后,细胞活力呈浓度依赖性降低。ROS抑制剂(NAC)预处理细胞1 h能显著抑制异泽兰黄素对细胞活力的抑制作用。10.0μg/ml异泽兰黄素作用细胞24 h能促进细胞ROS生成和细胞凋亡,细胞凋亡率为(47.20±1.60)%,与正常对照组相比具有显著统计学差异;促进JNK磷酸化水平和Bcl2表达水平,JNK磷酸化水平为(3.12±0.25)倍,Bcl2磷酸化水平为(2.84±0.22)倍,与正常对照组相比具有显著性差异。JNK磷酸化抑制剂和NAC均能显著抑制异泽兰黄素诱导的细胞凋亡和JNK的磷酸化。结论异泽兰黄素可诱导瘢痕组织成纤维细胞ROS的产生,通过激活JNK/Bcl2通路诱导细胞凋亡,从而抑制成千维细胞的增殖活性。