去甲斑蝥素对大肠癌患者HT-29细胞增殖及Livin、Caspase-3表达的影响

目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对大肠癌患者HT-29细胞增殖及Livin、Caspase-3表达的影响。方法体外培养人大肠癌HT-29细胞株,采用MTT法测定NCTD对HT-29细胞的增殖抑制情况,以免疫细胞化学法和RT-PCR法检测NCTD对HT-29细胞中Livin、Caspase-3表达的影响。结果浓度较低10μg/ml时,NCTD对HT-29细胞的抑制不明显,随着NCTD浓度增加,HT-29细胞抑制作用逐渐增强,NCTD浓度为100μg/ml,抑制率达90.82%,IC50为65.28μg/ml。NCTD作用12 h后即出现抑制效应,随着时间延长抑制率逐渐增强,36 h抑制率达55.84%,呈时间效应关系,最佳作用时间为36 h。将NCTD作用HT-29细胞前设为对照组,Livin多呈阳性表达,Caspase-3多呈阴性。IC50NCTD作用36 h后,NCTD组Livin蛋白表达显著低于对照组,Caspase-3蛋白表达高于对照组(P<0.05)。IC50NCTD作用36 h后,NCTD组Livin mRNA表达显著低于对照组,Caspase-3 mRNA表达显著高于对照组(P<0.01)。结论 NCTD可抑制HT-29细胞生长,能够降低细胞凋亡抑制因子Livin表达,其机制还可能与细胞凋亡信号通路中的重要环节Caspase-3有关。