实验室简易高效制备沙海蛰刺囊细胞方法研究

传统的刺囊细胞收集采用较为复杂的缓冲液系统及高相对离心力离心方法,这给捕捞现场实施成规模收集刺囊细胞增加了成本和技术难度。本文所研究的尝试采用廉价固定转速离心机,纯净水提取刺囊细胞,探讨海洋捕捞等户外操作现场的高效收集刺囊细胞方法。沙海蛰取自海南省琼州海峡沿岸,使用净化海水将沙海蛰触手自溶数日。自溶液移至离心管中以低相对离心力(900g)离心5min后,留沉淀物弃上清液。沉淀物用纯净水漂洗后移至超滤网上并低速再次离心后漂洗超滤网上附着细胞。血球计数板统计刺囊细胞数量。结果显示,自溶时间6h即可获得刺囊细胞,但细胞数量有限,96h及120h的细胞数量明显增多(16000±510个/m L及17000±670个/m L)。形态学特点显示96h自溶物中的细胞主要为麦粒形,形态完整,多数细胞刺囊内及刺囊口无刺囊针结构。高相对离心力(10000×g)对刺囊细胞结构具有一定破坏性,而低相对离心力(<900×g)对维持刺囊细胞结构的完整性有利。研究结果显示低相对离心力即可有效收集刺囊细胞。因低离心力减少了对细胞结构的机械破坏作用,是获取完整细胞较好的离心法。纯净水漂洗适合大规模细胞收集,比传统缓冲液收集法降低了成本。