白细胞介素-17对老年类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖和趋化因子分泌的影响及作用机制

目的探讨白细胞介素(IL)-17对老年类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞增殖和趋化因子分泌的影响及作用机制。方法选取行关节置管术的老年RA患者,从术中切除的新鲜滑膜组织中分离滑膜成纤维细胞进行培养。3-(4,5-二甲噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测IL-17对细胞增殖的影响;蛋白芯片试剂盒检测滑膜成纤维细胞上清液趋化因子[中性粒细胞激活肽(ENA)-78、IL-8、生长相关癌基因(GRO)、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1]的水平;流式细胞术检测滑膜成纤维细胞表面IL-17受体(IL-17R)的表达。在成纤维样滑膜细胞中分别加入MEK1/2信号通路抑制剂(PD98059)、核转录因子(NF)-κB信号通路抑制剂(LY294002)、STAT3信号通路抑制剂(AG490)、RANKL信号通路抑制剂(小白菊内酯),孵育60 min后加IL-17刺激72 h,荧光定量PCR法检测ENA-78、IL-8、GRO、MCP-1 mRNA表达水平。结果 IL-17对滑膜成纤维细胞各时间点刺激指数差异均有统计学意义(P<0.05),其中刺激72 h滑膜成纤维细胞增殖能力最强。IL-17刺激滑膜成纤维细胞48 h后,滑膜成纤维细胞分泌的ENA-78、IL-8、GRO、MCP-1水平均明显高于对照组(P<0.05)。流式细胞术显示,加入抗IL-17R抗体组IL-17R表达水平明显高于同型对照组(P<0.05)。滴加PD98059、LY294002、AG490后,ENA-78、IL-8、GRO、MCP-1 mRNA表达量均明显低于空白对照组(P<0.05);而滴加小白菊内酯后与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-17可促进老年RA成纤维样滑膜细胞增殖及趋化因子表达;IL-17可能通过MEK1/2、NF-κB、STAT3信号通路诱导滑膜成纤维细胞趋化因子表达。