Notch信号系统对骨髓间充质干细胞定向分化的影响及鳖甲煎丸的干预作用

目的通过Notch信号通路探讨鳖甲煎丸干预骨髓间充质干细胞(BMSCs)的作用机制,为鳖甲煎丸干预BMSCs移植治疗肝脏疾病提供理论依据。方法体外分离培养大鼠BMSCs,取第3代BMSCs随机分为空白对照组、肝细胞生长因子联合成纤维生长因子-4(HGF加FGF-4)组、鳖甲煎丸组、HGF加FGF-4联合鳖甲煎丸联合组,采用免疫细胞化学法检测Notch-1,ALB表达变化,用RT-PCR方法检测Notch1 mRNA表达变化。结果 (1)随着诱导时间的延长,白蛋白的阳性细胞率呈上升趋势,在相同时间点比较,各培养组与空白对照组相比,有显著差异(P<0.05或P<0.01);在诱导后21d、28d比较,鳖甲煎丸组的ALB阳性细胞率与HGF加FGF-4组相比,差异有显著性(P<0.05或P<0.01),其中HGF加FGF-4联合鳖甲煎丸组在诱导后第14天开始,其ALB阳性细胞率持续比HGF加FGF-4组高(P<0.05或P<0.01)。(2)各组Notch1蛋白阳性细胞表达率在14天后达到峰值,随之逐渐下降,在14d、21d、28d相同时间点比较,各培养组均高于空白对照组,有显著性差异。(P<0.01)。(3)各组Notch-1mRNA在14天后达到峰值,随之下降,其中在诱导后14d、21d、28d比较,鳖甲煎丸组及HGF加FGF-4联合鳖甲煎丸组中Notch-1 mRNA表达均高于空白对照组,差异有显著性(P<0.01)。在诱导后21d、28d,鳖甲煎丸组及HGF加FGF-4联合鳖甲煎丸组的Notch1 mRNA表达均高于HGF加FGF-4组,差异有显著性(P<0.01)。结论鳖甲煎丸能促进BMSCs分化为肝样细胞,其作用机制可能与调节BMSCs Notch信号通路中Notch-1蛋白以及Notch-1mRNA表达水平有关。