氧化苦参碱抑制TGF-β_1诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖及转化的机制

目的探讨氧化苦参碱(OMT)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与分化的抑制作用及其可能的机制。方法采用组织块法培养SD新生大鼠CFs,反复差速贴壁法分离纯化后建立TGF-β1诱导CFs增殖与分化的模型,免疫细胞化学法鉴定CFs,并分为对照组(无血清DMEM)、TGF-β1组(TGF-β1浓度20 ng/m L)、TGF-β1+OMT组(OMT浓度3.78×10-4mol/L)。MTT法检测各组CFs增殖水平,酶联免疫吸附法检测各组Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达,RT-PCR法检测Smad2 mRNA表达,Western blotting法检测Smad2、Smad3蛋白表达变化。结果与对照组比较,TGF-β1组CFs增殖水平升高,CFsⅠ、Ⅲ型胶原含量明显增加,Smad2 mRNA及Smad2、Smad3蛋白水平表达升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与TGF-β1组比较,TGF-β1+OMT组CFs增殖水平降低,CFsⅠ、Ⅲ型胶原含量明显减少,Smad2 mRNA及Smad2、Smad3蛋白水平表达降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 OMT对TGF-β1诱导的CFs增殖具有显著的抑制作用,其作用机制可能与抑制TGF-β/Smads信号系统下游调控蛋白Smad2、Smad3表达密切相关。