摘要
目的 :探讨免疫抑制剂雷帕霉素对雄性小鼠生殖能力的影响及相关机制。方法 :将29只不同日龄的SPF级B6雄性小鼠作为实验动物,将其中12只8 w的小鼠分为对照组小鼠(6只)与喂食组小鼠(6只)。将雷帕霉素加入小鼠的饲料中,为喂食组小鼠喂食4周。为对照组小鼠喂食正常的饲料。采用Western blot结合RT-PCR法检测m TOR信号通路重要组分蛋白在不同日龄的小鼠睾丸中表达的水平。采用睾丸和附睾HE染色法观察两组小鼠睾丸的大小、生精细胞的发育状况及附睾内精子的数目。采用CASA检测仪检测两组小鼠成熟精子的活力。采用western blot法检测对照组和喂食组小鼠睾丸组织中m TOR通路重要组分蛋白表达的水平。结果 :m TOR和Raptor在21 d的小鼠睾丸中呈高表达,Rictor在14 d的小鼠睾丸中呈高表达。与对照组小鼠相比,喂食组小鼠睾丸重量减小(t=7.907,P=0.001)。与对照组小鼠相比,喂食组小鼠的精子活力减弱,其精子中快速、中速及慢速运动精子的占比均降低,其精子中不运动精子的占比升高(P<0.05)。与对照组小鼠相比,喂食组小鼠睾丸中各级生精细胞的排布较混乱,其附睾中精子的细胞数量减少,其睾丸组织中m TOR信号通路重要组分蛋白Raptor/Rictor表达的水平下降,其下游直接作用蛋白p-S6、p-S473-AKT、p-T308-AKT表达的水平也下降。结论:免疫抑制剂雷帕霉素能够导致雄性小鼠睾丸和附睾的结构异常,影响其睾丸中成熟精子的生成。此药可通过影响m TOR信号通路的功能干扰雄性小鼠精子发生的过程。
