Twist对膀胱癌细胞迁移、侵袭及MMP-2、MMP-9表达的影响

Effect of Twist on bladder cancer cells migration,invasion and expressions of MMP-2,MMP-9

目的探讨Twist对膀胱癌细胞迁移、侵袭及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响。方法用qRT-PCR和Western印迹法分别检测膀胱癌5637、T24、BIU-87细胞和正常膀胱SVHUC-1细胞中Twist mRNA和蛋白水平,筛选表达水平最高的T24细胞,在T24细胞中转染shRNA Twist、shRNA对照命名为sh-Twist组和sh-NC组,并以不做处理的T24细胞为Con组,用qRT-PCR和Western印迹法测定各组细胞中Twist mRNA和蛋白水平,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移,Western印迹测定各组细胞中上皮间质转化(EMT)相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、上皮钙黏附素(E-cadherin)和侵袭迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9表达水平。结果与正常膀胱SVHUC-1细胞比较,Twist在膀胱癌细胞中转录和表达水平均明显升高(P<0.05)。sh-Twist组Twist mRNA和蛋白水平均明显低于Con组(P<0.05),sh-NC组Twist mRNA和蛋白水平与Con组相比差异无统计学意义(P>0.05)。sh-Twist组细胞迁移数目、侵袭数目及MMP-2、MMP-9蛋白水平均明显低于Con组(P<0.05),sh-NC组细胞迁移数目、侵袭数目及MMP-2、MMP-9蛋白水平与Con组相比差异无统计学意义(P>0.05)。sh-Twist组E-cadherin蛋白水平与Con组相比明显升高(P<0.05),Vimentin蛋白水平与Con组相比明显下降(P<0.05),而sh-NC组Vimentin、E-cadherin水平与Con组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Twist敲低能够降低膀胱癌细胞侵袭和迁移能力,抑制膀胱癌细胞EMT。