维生素D受体对高糖环境下足细胞凋亡及Caspase-3活化水平的影响及机制

目的探讨维生素D受体(VDR)对高糖环境下足细胞凋亡及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3活化水平影响及机制。方法用高糖处理足细胞,qRT-PCR、Western印迹测定VDR mRNA和蛋白水平。在足细胞中转染VDR真核表达载体,qRT-PCR、Western印迹测定转染后细胞中VDR mRNA和蛋白水平。用高糖培养液培养过表达VDR后的足细胞,膜联蛋白(Annexin)V-FITC/碘化丙啶(PI)双染法测定细胞凋亡,用比色法测定细胞中Caspase-3活性,Western印迹法测定细胞中信号转导与转录因子(STAT)3、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、p38、磷酸化的p38(p-p38)蛋白水平。结果高糖作用后足细胞中VDR mRNA和蛋白水平明显低于常规培养的足细胞(P<0.05)。VDR真核表达载体转染后足细胞中VDR mRNA和蛋白水平明显高于不做转染的细胞(P<0.05)。高糖作用后足细胞凋亡率明显升高,细胞中Caspase-3活性和p-p38、p-STAT3蛋白水平也升高,与常规培养的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。VDR过表达后足细胞经高糖培养后,细胞凋亡率和Caspase-3活性有所降低,细胞中pp38、p-STAT3蛋白水平有所降低,与单纯高糖培养的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论高糖作用后足细胞中VDR水平升高,且VDR拮抗高糖诱导的足细胞凋亡,降低高糖环境中细胞中Caspase-3活性,作用机制可能与STAT3、p38有关。