转录因子-21对宫颈癌细胞放疗敏感性及凋亡的影响

目的转录因子(TCF)-21对宫颈癌细胞放疗敏感性及凋亡的影响。方法 qRT-PCR和Western印迹检测宫颈癌组织及宫颈癌细胞中TCF-21 mRNA和蛋白水平,同时检测对应的癌旁组织和正常宫颈上皮细胞中TCF-21 mRNA和蛋白水平。筛选出表达水平最低的Si Ha细胞继续研究。Si Ha细胞转染pc DNA3.1空载体和TCF-21过表达载体(pc DNA3.1 TCF-21),qRT-PCR和Western印迹检测转染效果。以转染TCF-21过表达载体的Si Ha细胞为过表达组,以不处理的Si Ha细胞为对照组,经过8 Gy照射处理后为过表达+放疗组和对照+放疗组,流式细胞术检测各组凋亡情况,Western印迹检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(酶切Caspase)-3、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白水平。对照组和过表达组细胞经过0、2、4、6、8 Gy剂量照射处理后,细胞克隆实验检测细胞放疗敏感性。结果 TCF-21 mRNA和蛋白水平在宫颈癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05)。TCF-21 mRNA和蛋白水平由大到小依次为:End1/E6E7、He La、Ca Ski、Si Ha,后续选用Si Ha细胞继续研究。TCF-21过表达载体能够成功促进Si Ha细胞中TCF-21 mRNA和蛋白表达。过表达组、过表达+放疗组、对照+放疗组细胞凋亡率、酶切Caspase-3水平均明显高于对照组,而p-Akt水平明显低于对照组(P<0.05)。过表达+放疗组细胞凋亡率、酶切Caspase-3水平均明显高于对照+放疗组,而p-Akt水平明显低于对照+放疗组(P<0.05)。结论 TCF-21促进宫颈癌细胞凋亡,增加宫颈癌细胞放疗敏感性,作用机制可能与Akt磷酸化水平有关。