姜黄素通过活化PI3K/Akt信号通路逆转肝癌耐药细胞株Bel7402/ADR的耐药性

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的活化在姜黄素逆转肝癌耐药细胞株Bel7402/ADR耐药中的作用。方法采用阿霉素药物浓度递增法诱导建立肝癌耐药细胞株Bel7402/ADR;MTT法检测Bel7402/ADR细胞对阿霉素的敏感性,姜黄素对Bel7402/ADR细胞活性的影响及姜黄素对Bel7402/ADR细胞耐药逆转的作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western印迹法检测Bel7402和Bel7402/ADR细胞株中PI3K/AKT蛋白的表达水平;构建Bel7402/ADR皮下瘤模型,考察姜黄素对肿瘤生长的影响,最后通过检测小鼠体重及观察小鼠主要脏器的病理切片分析药物的在体毒性。结果 Bel7402/ADR细胞对阿霉素的半数抑制浓度(IC50)值为(1514.6±12.6)μg/ml,耐药倍数为24.3;姜黄素对Bel7402和Bel7402/ADR细胞活性均具有一定的抑制作用,IC50值分别为:(95.8±3.9)μg/ml和(101.4±3.1)μg/ml;5、10μg/ml姜黄素为Bel7402/ADR细胞无毒剂量,对Bel7402/ADR细胞的耐药逆转倍数分别为:1.97和3.51倍,并诱导细胞凋亡。姜黄素可以诱导细胞中PI3K/Akt蛋白表达水平的降低,并随着姜黄素的浓度升高而降低;姜黄素联合阿霉素可以有效抑制肿瘤生长,并表现很低的在体毒性。结论姜黄素在体和离体上可以显著逆转Bel7402/ADR的耐药性,并表现出很好的抗肿瘤效果,姜黄素的耐药逆转机制可能是抑制PI3K/Akt信号通路活化,下调PI3K/Akt蛋白表达,降低细胞对阿霉素的耐受性。