摘要
目的研究Six4在肝细胞癌(HCC)组织中表达与预后的关系,探索Six4在HCC细胞系中的生物学作用。方法应用组织芯片技术、免疫组织化学(IHC)、实时定量PCR(RT-PCR)、蛋白免疫印记(WB)检测Six4在HCC癌组织及相应癌旁、正常肝组织中的表达情况,分析Six4蛋白表达与HCC患者预后的关系;通过HCC细胞系培养、慢病毒介导RNA干扰技术(Lv-shRNA)、Transwell迁移实验、平板克隆、低黏附培养、CC8细胞增殖检测和裸鼠皮下荷瘤实验进一步明确Six4在HCC细胞中功能。结果 Six4蛋白在癌组织中表达较高。癌组织中,Six4蛋白主要定位在细胞核里;而在对应的癌旁组织中,很少有阳性的染色区域。对263例配对HCC组织染色状况进行统计,癌组织中呈现高表达183例,两者接近52例,低于癌旁染色28例。通过RT-PCR检测发现,癌组织中Six4的mRNA显著高于各自的癌旁组织和远端正常组织,且正常肝组织、癌旁组织和癌组织间差异有显著性。WB检测提示Six4蛋白在癌组织匀浆中表达更高。对263例HCC肿瘤样本进行评分和分级,0~1分113例;2~3分150例。高表达Six4的患者平均总生存期为25.7个月,低表达Six4患者为40.5个月;高表达Six4的患者平均无进展生存期为12.7个月,低表达Six4患者为21.3个月;与低表达Six4患者相比,高表达Six4患者生存时间更短,预后更差,差异有显著性。Six4在男性样本中表达水平高于女性;Six4表达越高,肿瘤越大,患者门静脉侵犯比例越高,BCLC分期和TNM分期也越差,提示患者的不良预后。IHC染色显示Six4蛋白在PVTT中表达高于原发癌组织,核阳性率也显著升高;PVTT中Six4的mRNA显著高于各自的原发肿瘤、癌旁和正常肝组织,且远端正常肝组织、癌旁组织、癌组织、癌栓组织间差异有显著性;WB检测也提示Six4蛋白在PVTT组织匀浆中表达更高。结论 Six4蛋白在HCC原发癌组织和癌栓组织中呈现高表达,其表达水平与HCC患者预后密切相关,可作为临床预测食管鳞癌患者预后的指标。
出处
《中国临床医生杂志》
2018年第7期801-805,共5页
Chinese Journal For Clinicians
基金
国家自然科学基金(81372355
81370066)