摘要
以从射干中分离纯化出的96株内生真菌DNA为研究对象,采用单因素试验设计,对影响SRAP-PCR反应的DNA模板、Mg2+、d NTPs、Taq DNA聚合酶和引物对浓度进行了优化,以确定适合射干内生真菌的SRAP-PCR反应最佳反应体系。结果表明,建立的射干内生真菌最佳反应体系为20μL,反应体系中含10×PCR buffer(不含Mg2+)2.0μL,DNA模板50 ng,Mg2+浓度为2.5mmol·L-1,d NTPs为0.5 mmol·L-1,引物1.0μmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.5U。利用该反应体系从90对引物中筛选出可扩增清晰、稳定性好条带的引物38对。该体系为今后利用SRAP分子标记技术开展射干内生真菌的分子遗传学研究奠定基础。
出处
《时珍国医国药》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期1447-1450,共4页
Lishizhen Medicine and Materia Medica Research
基金
西华师范大学博士启动基金(15E025)
四川省教育厅重大培育项目(15CZ0015)
四川省教育厅创新研究团队项目(16TD0020)
西华师范大学2017年全国大学生创新创业项目(201710638008)