人HEK293T细胞外泌体的蛋白质组学分析

Proteomics Analysis of Human HEK293T Cell Exosomes

目的建立一套完整的外泌体样品提取,液质联用蛋白质组学检测方法。方法采用超速离心法提取细胞培养液外泌体,经过FASP酶切,收集酶解肽段,通过Easy-Nano LC液相色谱仪和Triple TOF6600质谱仪(美国Sciex公司)液质联用检测外泌体全酶解产物,并通过ProteinPilot软件(Sciex)处理数据,检索Uniprot的相应数据库,从而鉴定外泌体蛋白质。结果通过超速离心法,成功提取到细胞培养液外泌体。并通过LC-MS-MS方法,软件分析和数据库检索到833个匹配蛋白。结论此方法可有效获取外泌体,并鉴定外泌体蛋白质。