环介导等温扩增快速检测生殖支原体的应用研究

目的建立环介导等温扩增(LAMP)快速检测生殖支原体(Mg)的方法并探讨该方法在临床诊断中的应用价值。方法培养生殖支原体,提取病原体DNA,设计Mg pdhD基因LAMP引物,优化并建立LAMP检测Mg的方法。分析LAMP法检测Mg DNA的灵敏度,并与PCR法进行对比。分析LAMP法检测Mg DNA的特异性。结果 LAMP法可在1h内实现Mg DNA的可视化检测,检测限为10fg,灵敏度高于PCR法(0.1pg)。LAMP法检测20例经确诊的Mg感染临床样本,结果均为阳性,对淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及大肠埃希菌的检测结果均为阴性。结论 LAMP检测Mg快速、简便、灵敏度高且特异性强,检测不需任何设备,借助荧光笔肉眼直接判读,有望成为社区及基层医院广泛开展的新方法。