摘要
目的：建立人骨肉瘤细胞多药耐药亚系。方法：采用ADM间断冲击法，将MG－63暴露于ADM中，残留存活细胞克隆，扩增建系，并用FITC标记的P－gp抗体检测Mdr 1表达情况，用MTT，ABA法及流式细胞术检测肿瘤细胞的耐药特征。结果：本实验建立了六株P－gp表达阳性多药耐药细胞亚系：MG－63／R1，MG－63／R2，MG－63／R3，MG－63／R4，MG－63／R5，MG－63／R6。用免疫荧光术可以检测到P－gp的表达，用MTT可见各亚系细胞相对于亲本细胞对ADM耐药分别增至1.6,4.8,11.8,33,49.2,71.5倍。ABA法显示诱导产生的细胞亚系细胞内ADM累积能力明显下降，这说明Mdr1表达P－gp增加，并用维拉帕米拮抗P－gp的作用，可见细胞内ADM累积能力不同程度上升，柔红霉素荧光直方图可见肿瘤细胞的耐药程度越来越高。结论：MDR1／P170在骨肉瘤的多药耐药的特性上起着至关重要的作用，而且这些骨肉瘤多药耐药细胞亚系为进一步研究骨肉瘤多药耐药的生物学特征及发展新的逆转多药耐药的药物打下基础。
