逆转录－聚合酶链反应测定多药耐药基因

目的建立一个用于测定多药耐药基因（ｍｄｒ１）表达水平、反映临床耐药情况的逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量技术。方法根据处于指数增长期的ＰＣＲ产物量可反映最初模板量多少的原理，以白血病为疾病模型，通过对最佳模板量及最佳循坏数的分析、参比对照的设定等，建立了３５Ｓ－ｄＡＴＰ（３５硫－脱氧三磷酸腺苷）掺入的ＲＴ－ＰＣＲ法，并以此法对１９例临床白血病标本ｍｄｒ１ｍＲ－ＮＡ（信使核糖核酸）表达水平进行了检测。结果１９例临床标本检测发现，６例化疗耐药或复发病例中，５例有高水平的ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达（ｍｄｒ１／β－ａｃｔｉｎ：０．６８～０．７６）（β－ａｃｔｉｎ：β肌动蛋白）。１１例化疗完全缓解或部分缓解病例中，除２例有低水平ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达（ｍｄｒ１／β－ａｃｔｉｎ：０．３３、０．４０）外，其余９例均为阴性。ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达水平和临床化疗结果明显相关（Ｐ＝０．０１７）。结论所建立的方法基本上可反映白血病患者化疗耐药情况，指导临床化疗。