多重聚合酶链反应检测新生儿性别决定基因

目的为了提高聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测人类性别决定基因（ｓｅｘ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎｏｆｔｈｅＹ，ＳＲＹ）的检出阳性率，建立了多重ＰＣＲ检测方法，使其准确度提高，保证实验准确无误。方法使用自行设计的一对引物（Ａ）与日本学者的引物对（Ｃ），同时对ＳＲＹ基因进行扩增的多重ＰＣＲ检测（ｍｕｌｔｉｐｌｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｓ，ｍｕｌｔｉｐｌｅＰＣＲ）方法。引物对Ａ扩增ＳＲＹ基因的产物为２８０ｂｐ（Ｙ）；引物对Ｃ作为实验内对照，其扩增产物为３５５ｂｐ（Ｙ）和５９０ｂｐ（Ｘ）。结果用这一多重聚合酶链反应技术测定了２０６例新生儿脐静脉血ＳＲＹ基因。其中１０５例男性标本均出现２８０、３５５和５９０ｂｐ三条扩增带；１０１例女性标本仅有一条５９０ｂｐ扩增带。结果证明本实验的特异性很好并且没有出现假阴性现象。结论两对引物同时扩增使实验更加准确，特别是使用了内对照，可以观察反应是否成功，起到了双保险的作用。避免了假阴性出现是本实验设计的主要特色。