山奈酚抑制小鼠黑色素瘤细胞增殖的缝隙连接机制观察

目的探讨山奈酚抑制小鼠黑色素瘤B16细胞增殖的作用机制。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16,采用MTT法检测山奈酚作用下细胞增殖抑制率,计算得出山奈酚对B16细胞的半数致死浓度为34.38μmol/L。将细胞随机分为四组,分别加入0(阴性对照)、12.5、25、50μmol/L山奈酚,作用72 h,光镜下观察各组细胞的数量及形态变化,采用荧光示踪法检测缝隙连接通讯功能;作用24 h时,采用Western blotting法检测Cx43蛋白表达。结果光镜下可见山奈酚组随着山奈酚浓度的升高,镜下细胞数量逐渐减少,细胞形态逐渐不规则,出现很多分支突起;50μmol/L组上述变化最为明显,且细胞核中出现明显颗粒状物质。0、12.5、25、50μmol/L山奈酚组每个供体细胞周围接受细胞的个数分别为(1.95±1.35)、(7.10±2.12)、(13.48±5.36)、(35.13±6.09)个,各浓度间比较P均<0.01。0、12.5、25、50μmol/L山奈酚组Cx43蛋白相对表达量分别为0.17、0.28、0.48、0.83,各浓度间比较P均<0.01。结论山奈酚可抑制小鼠黑色素瘤B16细胞增殖,具有明确的抗肿瘤作用;促进Cx43表达和缝隙连接通讯功能可能是其作用机制。