康莱特注射液对人NK细胞功能作用研究

Study on Functions of Kanglaite Injection to Human Natural Killer Cells

目的:探讨康莱特注射液(KLT)体外对晚期NSCLC患者及健康志愿者外周血来源诱导培养的自然杀伤细胞(naturalkillercell,NK)的增殖、免疫表型及其对肺癌A549细胞杀伤活性的影响。方法:分离晚期NSCLC患者及健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),第1天加入rh IL-2(1000IU/m L)、抗CD3单抗(10ng/m L),此后每隔24h补加CD3单抗10ng/m L,连续添加4天。第6天根据添加不同浓度的康莱特注射液分为A-E5组:A组(不加康莱特),B-E组(分别加康莱特0.25、0.5、1、2μL/m L)。细胞培养第10天及第15天,采用全自动血细胞计数仪计数各组NK细胞的增殖情况,第15天采用流式细胞术检测各组NK细胞中CD3^-CD56^+细胞比例,ELISA法检测各组NK细胞上清液中IFN-γ及TNF-α的分泌量,CCK-8法检测各组NK细胞对肺癌A549细胞的杀伤活性。结果:患者样本组与健康人样本组中各组NK细胞培养第15天,0.5~2μL/m LKLT组NK细胞数增加,NK细胞中CD3^-CD56^+细胞比例升高,NK细胞的IFN-γ、TNF-α分泌量升高,对肺癌A549细胞的杀伤活性增强,其中均以1μL/m LKLT组最明显,显著高于不加KLT对照组。结论:康莱特注射液对NK细胞的增殖具有一定的促进作用;康莱特注射液能够提高NK细胞中CD3^-CD56^+细胞比例;康莱特注射液增强NK细胞对肺癌A549细胞的杀伤活性可能与康莱特注射液上调NK细胞IFN-γ及TNF-α的表达有关。