虾过敏DNA疫苗的设计和构建

Design and construction of DNA vaccine against allergy caused by shrimp

通过"一珠一化合物"方法筛选虾过敏的抗原表位,加上免疫元件构建重组真核表达质粒。取对虾过敏患者的血清,纯化抗体。用所得抗体从耦联氨基酸多肽库中筛选出不同长度的多肽20个。在每个多肽前后加入免疫元件(KOZAK序列、Th-PADRE、Cp G1、Th-P18mn、Cp G2、t PA前导序列、多肽加尾信号),根据密码子表和JCAT网站选出适宜在小鼠内表达的DNA序列。按重叠PCR的方法设计6个20 bp的核苷酸链,通过PCR获得全长片段,双酶切连接入真核表达载体,构建重组表达质粒。经测序分析,证明成功构建虾抗原表位的重组表达质粒p CIneo-TM。本研究为虾过敏抗原表位在真核系统的表达以及已建立的虾过敏小鼠动物模型奠定了良好基础,可为虾过敏的治疗提供新的方法。