NP-7莫诺苷对急性心肌梗死大鼠血管新生的影响及其机制研究

目的:心血管疾病已成为威胁人类生命健康的重要疾病,急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)发病率呈迅速上升趋势。目前AMI的治疗方法对微细血管末梢病变和冠状动脉弥漫性病变的治疗效果不明显,且手术危险性高、费用昂贵以及术后可能发生血管再狭窄等问题。所以亟待发现治疗AMI的有效药物和治疗方法。我们前期研究结果表明莫诺苷有神经保护作用,可以促进神经发生、血管新生,改善微血管循环。由于缺血性心脏病与缺血性脑卒中有着相似的病理诱发机制,本文观察莫诺苷是否对AMI大鼠血管新生及心功能的影响,并初步探讨其促进血管新生的可能机制。方法:我们选取体重(260~280)g之间的雄性Sprague Dawley大鼠,结扎冠状动脉左前降支制备AMI模型。随机分为5个组:假手术组、模型组、莫诺苷低剂量组(45 mg·kg-1)、莫诺苷中剂量组(90 mg·kg-1)和莫诺苷高剂量组(180 mg·kg-1)。连续给予药物7天、14天、28天后取材,采用免疫荧光标记lectin/Ki67检测梗死周边区域新生内皮细胞,标记a-SMA检测梗死周边区域新生小动脉,标记lectin检测梗死周边区域血管密度;采用Western blot检测缺血心肌上VEGF下游Erk1/2增殖信号通路相关蛋白VEGFA及Src、PKC、Erk1/2的磷酸化水平;采用高分辨率小动物超声影像系统检测大鼠心脏功能。结果:造模7天后,与假手术组相比,模型组梗死周边区域新生内皮细胞和新生小动脉明显增多;同时VEGF下游Erk1/2信号通路相关蛋白VEGFA、p-Src、p-PKC、p-Erk1/2表达增加。与模型组相比,给予莫诺苷治疗后新生内皮细胞和新生小动脉显著增多,VEGF下游Erk1/2信号通路相关蛋白VEGFA、p-Src、p-PKC、p-Erk1/2表达水平均显著升高。造模7天和14天后,与假手术组相比,模型组梗死周边区域血管密度显著减少;与模型组相比,给予莫诺苷治疗14天后梗死周边区域血管密度显著增加。造模14天和28天后,超声心动结果显示,与假手术组相比,模型组射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)显著降低,心功能受损;与模型组相比,给予莫诺苷治疗后EF、FS值显著增加,左心室射血功能明显改善。结论:莫诺苷可以促进急性心肌梗死大鼠梗死周边区域血管新生,改善大鼠的心功能。此外,VEGF下游Erk1/2信号通路相关蛋白VEGFA、p-Src、p-PKC、p-Erk1/2很可能介导了莫诺苷促进急性心肌梗死大鼠血管新生的作用。