基于MultiBac的BmCPV病毒VP4基因克隆和表达

Cloning and expression of VP4 gene of BmCPV virus based on MultiBac

家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori Cytoplasmic polyhedrosis virus,Bm CPV)的S6片段即VP4基因(1686 bp)是该病毒的重要基因,实验以VP4和GFP基因为模板进行PCR扩增克隆,经由p FBDM质粒载体转化入大肠杆菌TOP10中,应用MultiBac多基因高效表达平台表达目的蛋白,使用荧光显微技术、SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定表达产物。研究结果表明重组表达质粒pFBDM-VP4-GFP构建成功,VP4蛋白正常表达,为Bm CPV病毒VP4蛋白的结构和功能研究奠定了基础。相比于传统脂质体转染技术,MultiBac多基因高效表达平台具有低成本、效率高、蛋白表达稳定性好、获得蛋白时间周期短等优点。