摘要
通过单因素考察结合正交试验的方法,基于反应体系中Taq DNA聚合酶量、DNA模板用量、d NTPs浓度、引物浓度、Mg2+浓度等5因素4水平条件对ISSR反应体系进行优化。白花蛇舌草ISSR-PCR的20μL最佳反应体系为引物浓度0. 562 5μmol/L,Mg2+浓度2. 75 mmol/L,d NTPs浓度0. 375 mmol/L,DNA模板量60 ng,Taq DNA聚合酶1. 25 U,2. 0μL 10×Taq Buffer,其余用dd H_2O补齐。该试验建立并优化了白花蛇舌草ISSR-PCR反应体系,为白花蛇舌草种质资源遗传多态性的研究提供参考依据。
出处
《江苏农业科学》
2018年第23期72-74,共3页
Jiangsu Agricultural Sciences
基金
广西中医药民族医药传承创新专项(编号:GZBZ16-05)
广西中医药大学中药学优势学科建设课题(编号:ZYX2015001)
壮瑶药协同创新中心项目(编号:桂教科研[2013]20号)
广西壮瑶药重点实验室项目(编号:桂科基字[2014]32号)
广西重点学科(壮药学)项目(编号:桂教科研[2013]16号)
广西八桂学者中药创新理论与药效研究项目